Хвала вам што сте посетили nature.com. Верзија прегледача коју користите има ограничену подршку за CSS. За најбоље искуство, препоручујемо да користите најновију верзију прегледача (или да искључите режим компатибилности у Internet Explorer-у). Поред тога, како би се осигурала континуирана подршка, ова страница неће садржати стилове или JavaScript.
Меламин је препознатљиви загађивач хране који може бити присутан у одређеним категоријама хране и случајно и намерно. Циљ ове студије био је да се провери детекција и квантификација меламина у формули за одојчад и млеку у праху. Анализирано је укупно 40 комерцијално доступних узорака хране, укључујући формулу за одојчад и млеко у праху, из различитих региона Ирана. Приближан садржај меламина у узорцима одређен је коришћењем система високоефикасне течне хроматографије-ултраљубичастог (HPLC-UV). Калибрациона крива (R2 = 0,9925) је конструисана за детекцију меламина у опсегу од 0,1–1,2 μг mL−1. Границе квантификације и детекције биле су 1 μг mL−1 и 3 μг mL−1, респективно. Меламин је тестиран у формули за одојчад и млеку у праху, а резултати су показали да су нивои меламина у узорцима формуле за одојчад и млека у праху били 0,001–0,095 мг kg−1 и 0,001–0,004 мг kg−1, респективно. Ове вредности су у складу са законодавством ЕУ и Кодексом Алиментаријус. Важно је напоменути да конзумација ових млечних производа са смањеним садржајем меламина не представља значајан ризик по здравље потрошача. То је такође поткрепљено резултатима процене ризика.
Меламин је органско једињење молекулске формуле C3H6N6, изведено из цијанамида. Има веома ниску растворљивост у води и садржи приближно 66% азота. Меламин је широко коришћено индустријско једињење са широким спектром легитимних употреба у производњи пластике, ђубрива и опреме за прераду хране (укључујући амбалажу за храну и кухињско посуђе)1,2. Меламин се такође користи као носач лекова за лечење болести. Висок удео азота у меламину може довести до злоупотребе једињења и преноса својстава протеинских молекула на састојке хране3,4. Стога, додавање меламина прехрамбеним производима, укључујући млечне производе, повећава садржај азота. Стога је погрешно закључено да је садржај протеина у млеку већи него што је заправо био.
За сваки додатни грам меламина, садржај протеина у храни ће се повећати за 0,4%. Међутим, меламин је високо растворљив у води и може проузроковати озбиљнију штету. Додавање 1,3 грама меламина течним производима као што је млеко може повећати садржај протеина у млеку за 30%5,6. Иако се меламин додаје животињској, па чак и људској храни ради повећања садржаја протеина7, Комисија за Codex Alimentarius (CAC) и националне власти нису одобриле меламин као адитив за храну и навеле су га као опасан ако се прогута, удише или апсорбује кроз кожу. Године 2012, Међународна агенција за истраживање рака Светске здравствене организације (СЗО) навела је меламин као канцероген класе 2Б јер може бити штетан по људско здравље8. Дуготрајно излагање меламину може изазвати рак или оштећење бубрега2. Меламин у храни може се комплексовати са цијанурном киселином и формирати жуте кристале нерастворљиве у води који могу проузроковати оштећење ткива бубрега и бешике, као и рак уринарног тракта и губитак тежине9,10. Може изазвати акутно тровање храном и, у високим концентрацијама, смрт, посебно код одојчади и мале деце.11 Светска здравствена организација (СЗО) је такође поставила толерантни дневни унос (ТДИ) меламина за људе на 0,2 мг/кг телесне тежине дневно на основу смерница CAC.12 Америчка агенција за храну и лекове (US FDA) поставила је максимални ниво остатака за меламин на 1 мг/кг у формули за одојчад и 2,5 мг/кг у другој храни.2,7 У септембру 2008. године објављено је да је неколико домаћих произвођача формуле за одојчад додало меламин у млеко у праху како би повећали садржај протеина у својим производима, што је резултирало тровањем млеком у праху и изазвало национални инцидент тровања меламином у којем је оболело више од 294.000 деце, а хоспитализовано више од 50.000. 13
Дојење није увек могуће због различитих фактора као што су тешкоће градског живота, болест мајке или детета, што доводи до употребе формуле за одојчад за исхрану одојчади. Као резултат тога, основане су фабрике за производњу формуле за одојчад која је по саставу што сличнија мајчином млеку14. Формула за одојчад која се продаје на тржишту обично се прави од крављег млека и обично се прави са посебном мешавином масти, протеина, угљених хидрата, витамина, минерала и других једињења. Да би била слична мајчином млеку, садржај протеина и масти у формули варира, а у зависности од врсте млека, обогаћена је једињењима као што су витамини и минерали као што је гвожђе15. Пошто су одојчад осетљива група и постоји ризик од тровања, безбедност конзумирања млека у праху је од виталног значаја за здравље. Након случаја тровања меламином међу кинеским одојчадима, земље широм света су посветиле велику пажњу овом питању, а осетљивост ове области је такође порасла. Стога је посебно важно појачати контролу производње формуле за одојчад како би се заштитило здравље одојчади. Постоје различите методе за детекцију меламина у храни, укључујући високоефикасну течну хроматографију (HPLC), електрофорезу, сензорну методу, спектрофотометрију и ензимски имуносорбентни тест антиген-антитело16. Америчка агенција за храну и лекове (FDA) је 2007. године развила и објавила HPLC методу за одређивање меламина и цијанурне киселине у храни, што је најефикаснија метода за одређивање садржаја меламина17.
Концентрације меламина у формули за одојчад, мерене новом техником инфрацрвене спектроскопије, кретале су се од 0,33 до 0,96 милиграма по килограму (мг кг-1). 18 Студија спроведена у Шри Ланки открила је да се нивои меламина у пуномасном млеку у праху крећу од 0,39 до 0,84 мг кг-1. Поред тога, увезени узорци формуле за одојчад садржали су највише нивое меламина, 0,96 и 0,94 мг/кг, респективно. Ови нивои су испод регулаторне границе (1 мг/кг), али је потребан програм праћења ради безбедности потрошача. 19
Неколико студија је испитало нивое меламина у иранским формулама за одојчад. Око 65% узорака садржало је меламин, са просеком од 0,73 мг/кг и максимумом од 3,63 мг/кг. Друга студија је показала да се ниво меламина у формули за одојчад кретао од 0,35 до 3,40 μг/кг, са просеком од 1,38 μг/кг. Генерално, присуство и ниво меламина у иранским формулама за одојчад процењени су у разним студијама, при чему су неки узорци који садрже меламин прелазили максималну границу коју су поставили регулаторни органи (2,5 мг/кг/храна).
Узимајући у обзир огромну директну и индиректну потрошњу млека у праху у прехрамбеној индустрији и посебан значај формуле за одојчад у исхрани деце, циљ ове студије био је да се валидира метода детекције меламина у млеку у праху и формули за одојчад. У ствари, први циљ ове студије био је да се развије брза, једноставна и тачна квантитативна метода за детекцију фалсификовања меламином у формули за одојчад и млеку у праху коришћењем високоефикасне течне хроматографије (HPLC) и ултраљубичасте (UV) детекције; Друго, циљ ове студије био је да се утврди садржај меламина у формули за одојчад и млеку у праху које се продаје на иранском тржишту.
Инструменти који се користе за анализу меламина варирају у зависности од локације производње хране. За мерење остатака меламина у млеку и формули за одојчад коришћена је осетљива и поуздана HPLC-UV метода анализе. Млечни производи садрже различите протеине и масти који могу ометати мерење меламина. Стога, како су напоменули Сун и др.22, неопходна је одговарајућа и ефикасна стратегија чишћења пре инструменталне анализе. У овој студији користили смо филтере за шприцеве ​​за једнократну употребу. У овој студији користили смо C18 колону за одвајање меламина у формули за одојчад и млеку у праху. Слика 1 приказује хроматограм за детекцију меламина. Поред тога, опоравак узорака који садрже 0,1–1,2 мг/кг меламина кретао се од 95% до 109%, једначина регресије је била y = 1,2487x − 0,005 (r = 0,9925), а вредности релативне стандардне девијације (RSD) кретале су се од 0,8 до 2%. Доступни подаци указују на то да је метода поуздана у проучаваном опсегу концентрација (Табела 1). Инструментална граница детекције (LOD) и граница квантификације (LOQ) меламина биле су 1 μg mL−1 и 3 μg mL−1, респективно. Поред тога, УВ спектар меламина показао је апсорпциону траку на 242 nm. Метода детекције је осетљива, поуздана и тачна. Ова метода се може користити за рутинско одређивање нивоа меламина.
Сличне резултате објавило је неколико аутора. За анализу меламина у млечним производима развијена је метода високоефикасне течне хроматографије са фотодиодним низом (HPLC). Доње границе квантификације биле су 340 μг кг−1 за млеко у праху и 280 μг кг−1 за формулу за одојчад на 240 nm. Филацзи и др. (2012) су известили да меламин није детектован у формули за одојчад помоћу HPLC-а. Међутим, 8% узорака млека у праху садржало је меламин на нивоу од 0,505–0,86 мг/кг. Тителмиет и др.23 су спровели сличну студију и утврдили да садржај меламина у формули за одојчад (број узорка: 72) помоћу високоефикасне течне хроматографије са масеном спектрометријом/MS (HPLC-MS/MS) износи приближно 0,0431–0,346 мг кг−1. У студији коју су спровели Венкатасами и др. (2010), за процену меламина у формули за одојчад и млеку коришћени су приступ зелене хемије (без ацетонитрила) и течна хроматографија високих перформанси са обрнутом фазом (RP-HPLC). Распон концентрације узорка био је од 1,0 до 80 г/мл, а одговор је био линеаран (r > 0,999). Метода је показала опоравак од 97,2–101,2 у опсегу концентрације од 5–40 г/мл, а репродуктивност је била мања од 1,0% релативне стандардне девијације. Штавише, уочене LOD и LOQ вредности биле су 0,1 г мл−1 и 0,2 г мл−124, респективно. Лутер и др. (2011) су одредили контаминацију меламином у крављем млеку и формули за одојчад на бази млека користећи HPLC-UV. Концентрације меламина кретале су се од < 0,2 до 2,52 мг кг−1. Линеарни динамички опсег HPLC-UV методе био је 0,05 до 2,5 мг кг⁻¹ за кравље млеко, 0,13 до 6,25 мг кг⁻¹ за формулу за одојчад са масеним уделом протеина <15% и 0,25 до 12,5 мг кг⁻¹ за формулу за одојчад са масеним уделом протеина од 15%. Резултати LOD (и LOQ) били су 0,03 мг кг⁻¹ (0,09 мг кг⁻¹) за кравље млеко, 0,06 мг кг⁻¹ (0,18 мг кг⁻¹) за формулу за одојчад <15% протеина и 0,12 мг кг⁻¹ (0,36 мг кг⁻¹) за формулу за одојчад са 15% протеина, са односом сигнал-шум од 3 и 1025 за LOD и LOQ, респективно. Дибес и др. (2012) истраживали су нивое меламина у узорцима формуле за одојчад и млека у праху користећи HPLC/DMD. У формули за одојчад, најнижи и највиши нивои су били 9,49 мг кг⁻¹ и 258 мг кг⁻¹, респективно. Граница детекције (LOD) је била 0,05 мг кг⁻¹.
Џаваид и др. су известили да су остаци меламина у формули за одојчад били у распону од 0,002–2 мг кг⁻¹ помоћу Фуријеове трансформационе инфрацрвене спектроскопије (FT-MIR) (LOD = 1 мг кг⁻¹; LOQ = 3,5 мг кг⁻¹). Резаи и др.27 су предложили HPLC-DDA (λ = 220 nm) методу за процену меламина и постигли LOQ од 0,08 μг мл⁻¹ за млеко у праху, што је било ниже од нивоа добијеног у овој студији. Сан и др. су развили RP-HPLC-DAD за детекцију меламина у течном млеку екстракцијом чврсте фазе (SPE). Добили су LOD и LOQ од 18 и 60 μг кг⁻¹²⁻¹, респективно, што је осетљивије од тренутне студије. Монтесано и др. потврдили су ефикасност HPLC-DMD методе за процену садржаја меламина у протеинским суплементима са границом квантификације од 0,05–3 мг/кг, што је било мање осетљиво од методе коришћене у овој студији29.
Несумњиво је да аналитичке лабораторије играју важну улогу у заштити животне средине праћењем загађивача у различитим узорцима. Међутим, употреба великог броја реагенса и растварача током анализе може довести до стварања опасних остатака. Стога је 2000. године развијена зелена аналитичка хемија (GAC) како би се смањили или елиминисали негативни ефекти аналитичких поступака на оператере и животну средину26. Традиционалне методе детекције меламина, укључујући хроматографију, електрофорезу, капиларну електрофорезу и ензимски имуносорбентни тест (ELISA), коришћене су за идентификацију меламина. Међутим, међу бројним методама детекције, електрохемијски сензори су привукли велику пажњу због своје одличне осетљивости, селективности, брзог времена анализе и карактеристика прилагођених корисницима30,31. Зелена нанотехнологија користи биолошке путеве за синтезу наноматеријала, што може смањити стварање опасног отпада и потрошњу енергије, чиме се промовише примена одрживих пракси. Нанокомпозити, на пример, направљени од еколошки прихватљивих материјала, могу се користити у биосензорима за детекцију супстанци као што је меламин32,33,34.
Студија показује да се чврстофазна микроекстракција (SPME) ефикасно користи због своје веће енергетске ефикасности и одрживости у поређењу са традиционалним методама екстракције. Еколошка прихватљивост и енергетска ефикасност SPME чине је одличном алтернативом традиционалним методама екстракције у аналитичкој хемији и пружају одрживији и ефикаснији метод за припрему узорака35.
Ву и сарадници су 2013. године развили високо осетљив и селективни биосензор површинске плазмонске резонанце (мини-SPR) који користи спрезање између меламина и антитела против меламина за брзо откривање меламина у формули за одојчад помоћу имунолошког теста. SPR биосензор у комбинацији са имунолошким тестом (користећи меламин-коњуговани говеђи серумски албумин) је једноставна за употребу и јефтина технологија са границом детекције од само 0,02 μг mL-136.
Насири и Абасијан су користили преносиви сензор високог потенцијала у комбинацији са композитима графен оксид-хитозан (GOCS) за детекцију меламина у комерцијалним узорцима37. Ова метода је показала изузетно високу селективност, тачност и брзину одзива. GOCS сензор је показао изузетну осетљивост (239,1 μM−1), линеарни опсег од 0,01 до 200 μM, константу афинитета од 1,73 × 104 и LOD до 10 nM. Штавише, студија коју су спровели Чандрасекар и др. 2024. године усвојила је еколошки прихватљив и исплатив приступ. Користили су екстракт коре папаје као редукционо средство за синтезу наночестица цинк оксида (ZnO-NP) еколошки прихватљивом методом. Након тога, развијена је јединствена техника микро-Раманове спектроскопије за одређивање меламина у формули за одојчад. ZnO-NP добијене из пољопривредног отпада показале су потенцијал као вредан дијагностички алат и поуздана, јефтина технологија за праћење и детекцију меламина38.
Ализадех и др. (2024) користили су високо осетљиву флуоресцентну платформу са метал-органским оквиром (MOF) за одређивање меламина у млеку у праху. Линеарни опсег и доња граница детекције сензора, одређени помоћу 3σ/S, били су од 40 до 396,45 nM (еквивалентно 25 μg kg−1 до 0,25 mg kg−1) и 40 nM (еквивалентно 25 μg kg−1), респективно. Овај опсег је знатно испод максималних нивоа остатака (MRL) утврђених за идентификацију меламина у формули за одојчад (1 mg kg−1) и другим узорцима хране/сточне хране (2,5 mg kg−1). Флуоресцентни сензор (тербијум (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) показао је већу тачност и прецизније мерење од HPLC39 у детекцији меламина у млеку у праху. Биосензори и нанокомпозити у зеленој хемији не само да побољшавају могућности детекције већ и минимизирају опасности по животну средину у складу са принципима одрживог развоја.
Принципи зелене хемије примењени су на различите методе за одређивање меламина. Један приступ је развој методе зелене дисперзивне микроекстракције чврсте фазе коришћењем природног поларног полимера β-циклодекстрина умреженог лимунском киселином за ефикасну екстракцију меламина 40 из узорака као што су формула за одојчад и топла вода. Друга метода користи Манихову реакцију за одређивање меламина у узорцима млека. Ова метода је јефтина, еколошки прихватљива и веома прецизна са линеарним опсегом од 0,1–2,5 ppm и ниском границом детекције 41. Штавише, развијена је исплатива и еколошки прихватљива метода за квантитативно одређивање меламина у течном млеку и формули за одојчад коришћењем Фуријеове трансформационе инфрацрвене трансмисионе спектроскопије са високом тачношћу и границама детекције од 1 ppm и 3,5 ppm, респективно 42. Ове методе демонстрирају примену принципа зелене хемије на развој ефикасних и одрживих метода за одређивање меламина.
Неколико студија је предложило иновативне методе за детекцију меламина, као што је употреба екстракције чврсте фазе и високоефикасне течне хроматографије (HPLC)43, као и брза високоефикасне течна хроматографија (HPLC), која не захтева сложену претходну обраду или реагенсе за јонске парове, чиме се смањује количина хемијског отпада44. Ове методе не само да пружају тачне резултате за одређивање меламина у млечним производима, већ су и у складу са принципима зелене хемије, минимизирајући употребу опасних хемикалија и смањујући укупни утицај аналитичког процеса на животну средину.
Четрдесет узорака различитих марки тестирано је у три примерка, а резултати су приказани у Табели 2. Нивои меламина у узорцима формуле за одојчад и млека у праху кретао се од 0,001 до 0,004 мг/кг и од 0,001 до 0,095 мг/кг, респективно. Нису примећене значајне промене између три старосне групе формуле за одојчад. Поред тога, меламин је откривен у 80% млека у праху, али је 65% формула за одојчад било контаминирано меламином.
Садржај меламина у индустријском млеку у праху био је већи него у формули за одојчад, а разлика је била значајна (p<0,05) (Слика 2).
Добијени резултати су били испод граница које је поставила FDA (испод 1 и 2,5 мг/кг). Поред тога, резултати су у складу са границама које су поставили CAC (2010) и EU45,46, тј. максимално дозвољена граница је 1 мг кг-1 за формулу за одојчад и 2,5 мг кг-1 за млечне производе.
Према студији Ганатија и др. из 2023. године,47 садржај меламина у различитим врстама пакованог млека у Ирану кретао се од 50,7 до 790 μг кг−1. Њихови резултати су били испод дозвољене границе ФДА. Наши резултати су нижи од резултата Шодера и др.48 и Риме и др.49. Шодер и др. (2010) су открили да су се нивои меламина у млеку у праху (n=49) одређени ELISA методом кретали од 0,5 до 5,5 мг/кг. Рима и др. су анализирали остатке меламина у млеку у праху флуоресцентном спектрофотометријом и открили да је садржај меламина у млеку у праху био 0,72–5,76 мг/кг. Студија је спроведена у Канади 2011. године ради праћења нивоа меламина у формули за одојчад (n=94) коришћењем течне хроматографије (LC/MS). Утврђено је да су концентрације меламина испод прихватљиве границе (прелиминарни стандард: 0,5 мг кг−1). Мало је вероватно да су откривени лажни нивои меламина били тактика коришћена за повећање садржаја протеина. Међутим, то се не може објаснити употребом ђубрива, премештањем садржаја контејнера или сличним факторима. Штавише, извор меламина у млеку у праху увезеном у Канаду није откривен50.
Хасани и др. су 2013. године мерили садржај меламина у млеку у праху и течном млеку на иранском тржишту и пронашли сличне резултате. Резултати су показали да су, осим једне марке млека у праху и течног млека, сви остали узорци били контаминирани меламином, са нивоима у распону од 1,50 до 30,32 μг г−1 у млеку у праху и од 0,11 до 1,48 μг мл−1 у млеку. Приметно је да цијанурна киселина није откривена ни у једном узорку, што смањује могућност тровања меламином за потрошаче.51 Претходне студије су процењивале концентрацију меламина у чоколадним производима који садрже млеко у праху. Око 94% увезених узорака и 77% иранских узорака садржало је меламин. Нивои меламина у увезеним узорцима кретао се од 0,032 до 2,692 мг/кг, док су се они у иранским узорцима кретали од 0,013 до 2,600 мг/кг. Генерално, меламин је откривен у 85% узорака, али само једна специфична марка је имала нивое изнад дозвољене границе.44 Тителмијер и др. су известили о нивоима меламина у млеку у праху у распону од 0,00528 до 0,0122 мг/кг.
Табела 3 сумира резултате процене ризика за три старосне групе. Ризик је био мањи од 1 у свим старосним групама. Стога, не постоји неканцерогени здравствени ризик од меламина у формули за одојчад.
Нижи нивои контаминације млечних производа могу бити последица ненамерне контаминације током припреме, док виши нивои могу бити последица намерног додавања. Штавише, укупни ризик по људско здравље од конзумирања млечних производа са ниским нивоима меламина сматра се ниским. Може се закључити да конзумирање производа који садрже тако ниске нивое меламина не представља никакав ризик по здравље потрошача52.
Узимајући у обзир важност управљања безбедношћу хране у млечној индустрији, посебно у погледу заштите јавног здравља, од највеће је важности развити и валидирати методу за процену и упоређивање нивоа и остатака меламина у млеку у праху и формули за одојчад. Развијена је једноставна и прецизна HPLC-UV спектрофотометријска метода за одређивање меламина у формули за одојчад и млеку у праху. Метода је валидирана како би се осигурала њена поузданост и тачност. Показало се да су границе детекције и квантификације методе довољно осетљиве за мерење нивоа меламина у формули за одојчад и млеку у праху. Према нашим подацима, меламин је детектован у већини иранских узорака. Сви детектовани нивои меламина били су испод максимално дозвољених граница које је поставио CAC, што указује да конзумација ових врста млечних производа не представља ризик по људско здравље.
Сви коришћени хемијски реагенси били су аналитичког квалитета: меламин (2,4,6-триамино-1,3,5-триазин) чистоће 99% (Sigma-Aldrich, Сент Луис, Мисури); ацетонитрил HPLC квалитета (Merck, Дармштат, Немачка); ултрачиста вода (Millipore, Морфхајм, Француска). Филтери за шприцеве ​​за једнократну употребу (Chromafil Xtra PVDF-45/25, величина пора 0,45 μm, пречник мембране 25 mm) (Macherey-Nagel, Дирен, Немачка).
За припрему узорака коришћена је ултразвучна када (Elma, Немачка), центрифуга (Beckman Coulter, Krefeld, Немачка) и HPLC (KNAUER, Немачка).
Коришћен је течни хроматограф високих перформанси (KNAUER, Немачка) опремљен УВ детектором. Услови HPLC анализе били су следећи: коришћен је UHPLC Ultimate систем опремљен аналитичком колоном ODS-3 C18 (4,6 mm × 250 mm, величина честица 5 μm) (MZ, Немачка). HPLC елуент (мобилна фаза) била је смеша TFA/метанол (450:50 mL) са брзином протока од 1 mL min-1. Таласна дужина детекције била је 242 nm. Запремина убризгавања била је 100 μL, температура колоне 20 °C. Пошто је време задржавања лека дуго (15 минута), следећа убризгавања треба да се изврши након 25 минута. Меламин је идентификован упоређивањем времена задржавања и врха УВ спектра меламинских стандарда.
Стандардни раствор меламина (10 μг/мл) је припремљен коришћењем воде и чуван у фрижидеру (4 °C), заштићено од светлости. Разблажити основни раствор мобилном фазом и припремити радне стандардне растворе. Сваки стандардни раствор је убризган у HPLC 7 пута. Калибрациона једначина 10 је израчуната регресионом анализом одређене површине пика и одређене концентрације.
Комерцијално доступно кравље млеко у праху (20 узорака) и узорци различитих марки формуле за одојчад на бази крављег млека (20 узорака) купљени су у локалним супермаркетима и апотекама у Ирану за исхрану одојчади различитих узраста (0–6 месеци, 6–12 месеци и >12 месеци) и чувани на фрижидеру (4 °C) до анализе. Затим је 1 ± 0,01 г хомогенизованог млека у праху измерено и помешано са ацетонитрилом:водом (50:50, v/v; 5 mL). Смеша је мешана 1 минут, затим соницирана у ултразвучној кади 30 минута и на крају мућкана 1 минут. Смеша је затим центрифугирана на 9000 × g током 10 минута на собној температури и супернатант је филтриран у бочицу за аутосамплер од 2 ml користећи шприц филтер од 0,45 μm. Филтрат (250 μl) је затим помешан са водом (750 μl) и убризган у HPLC систем10,42.
Да бисмо валидирали методу, одредили смо опоравак, тачност, границу детекције (LOD), границу квантификације (LOQ) и прецизност под оптималним условима. LOD је дефинисан као садржај узорка са висином пика три пута већом од основног нивоа шума. С друге стране, садржај узорка са висином пика 10 пута већом од односа сигнал-шум дефинисан је као LOQ.
Одзив уређаја је одређен коришћењем калибрационе криве која се састоји од седам тачака података. Коришћени су различити садржаји меламина (0, 0,2, 0,3, 0,5, 0,8, 1 и 1,2). Одређена је линеарност поступка израчунавања меламина. Поред тога, неколико различитих нивоа меламина је додато у слепе пробе. Калибрациона крива је конструисана континуираним убризгавањем 0,1–1,2 μг мл−1 стандардног раствора меламина у узорке формуле за одојчад и млека у праху, а њен R2 = 0,9925. Тачност је процењена поновљивошћу и репродуктивношћу поступка и постигнута је убризгавањем узорака првог и три наредна дана (у три примерка). Поновљивост методе је процењена израчунавањем RSD % за три различите концентрације додатог меламина. Студије опоравка су спроведене да би се одредила прецизност. Степен опоравка методом екстракције израчунат је на три нивоа концентрације меламина (0,1, 1,2, 2) у узорцима формуле за одојчад и млека у праху9,11,15.
Процењени дневни унос (EDI) је одређен коришћењем следеће формуле: EDI = Ci × Cc/BW.
Где је Ci просечан садржај меламина, Cc је потрошња млека, а BW је просечна тежина деце.
Анализа података је извршена коришћењем SPSS 24. Нормалност је тестирана коришћењем Колмогоров-Смирновљевог теста; сви подаци су били непараметријски тестови (p = 0). Стога су Крускал-Волисов тест и Ман-Витнијев тест коришћени за утврђивање значајних разлика између група.
Ингелфингер, млађи. Меламин и његов утицај на глобалну контаминацију хране. New England Journal of Medicine 359(26), 2745–2748 (2008).
Линч, РА и др. Утицај pH вредности на миграцију меламина у дечјим чинијама. Међународни часопис за контаминацију хране, 2, 1–8 (2015).
Барет, МП и Гилберт, ИХ. Усмеравање токсичних једињења на унутрашњост трипаносома. Progress in Parasitology 63, 125–183 (2006).
Нирман, МФ и др. Ин витро и ин виво евалуација меламинских дендримера као возила за испоруку лекова. Међународни фармацеутски часопис, 281(1–2), 129–132(2004).
Светска здравствена организација. Експертски састанци 1–4 за преглед токсиколошких аспеката меламина и цијанурне киселине (2008).
Хау, АК-Ц., Кван, ТХ и Ли, ПК-Т. Токсичност меламина и бубрег. Часопис Америчког друштва за нефрологију 20(2), 245–250 (2009).
Озтурк, С. и Демир, Н. Развој новог IMAC адсорбента за идентификацију меламина у млечним производима методом течне хроматографије високих перформанси (HPLC). Часопис за синтезу и анализу хране 100, 103931 (2021).
Чансуварн, В., Паник, С. и Имим, А. Једноставно спектрофотометријско одређивање меламина у течном млеку на основу Манихове зелене реакције. Spectrochem. Acta Part A Mol. Biomol. Spectrosc. 113, 154–158 (2013).
Дибес, М. и Ел-Хабиб, Р. Одређивање меламина у формули за одојчад, млеку у праху и узорцима пангасиуса помоћу HPLC/диодне хроматографије. Часопис за аналитичку токсикологију животне средине, 2(137), 2161–0525.1000137 (2012).
Скинер, К. Г., Томас, Џ. Д. и Остерлох, Џ. Д. Токсичност меламина. Часопис за медицинску токсикологију, 6, 50–55 (2010).
Светска здравствена организација (СЗО), Токсикологија и здравствени аспекти меламина и цијанурне киселине: Извештај са заједничког стручног састанка СЗО/ФАО уз подршку Министарства здравља Канаде, Отава, Канада, 1-4. децембар 2008. (2009).
Корма, СА и др. Упоредна студија састава липида и квалитета праха за одојчад који садржи нове функционалне структурне липиде и комерцијалне формуле за одојчад. Европска истраживања и технологија хране 246, 2569–2586 (2020).
Ел-Васиф, М. и Хашем, Х. Побољшање нутритивне вредности, квалитетних својстава и рока трајања формуле за одојчад употребом палминог уља. Блискоисточни часопис за пољопривредна истраживања 6, 274–281 (2017).
Јин, В. и др. Производња моноклонских антитела против меламина и развој индиректне конкурентне ELISA методе за детекцију меламина у сировом млеку, млеку у праху и сточној храни. Часопис за пољопривредну и прехрамбену хемију 58(14), 8152–8157 (2010).